Радикальна зі полімеризація 14с-акриламіду з компонентами клітин і включення 3н-тимідину в культурі щурячих фібробластів при аденовірусної інфекції

У дослідженнях останніх років виявлені певні кінетичні закономірності в зміні концентрації вільних радикалів при різних бластоматозного процесах, включаючи і вірусний канцерогенез (Ю. П. Козлов, 1973- А. І. Агеенко, 1974- Н. М. Емануель і ін., 1976- Н. М. Емануель, 1977).

Встановлена пряма кореляція між посиленням інтенсивності гліколізу і концентрацією вільних радикалів в процесі пухлинного перетворення клітин під дією онкогенних аденовірусів (А. І. Агеенко, 1974). Важливо відзначити, що спостерігаються патологічні порушення в клітинах виникали відразу ж при первинному контакті онковірус з кліткою.

Можна припустити, що зміна рівня вільних радикалів в клітинах після зараження вірусом А12 пов`язано з перебудовою енергетичного обміну, що супроводжує інтенсифікацію синтетичних процесів, а саме синтез клітинної ДНК.

Даний розділ роботи, проведений А. І. Агеенко і І. Я. Коган спільно з Ю. П. Козловим і П. В. Гулак, являє собою перевірку цього припущення шляхом одночасної реєстрації швидкості включення 3Н-тимідину в клітини ФЕК (зараження вірусом А12 і контрольні) і рівня вільнорадикальних реакцій в них на перших етапах вірусної інфекції.

Результати вимірювання радіоактивності клітин, віднесені до кількості цих клітин в кожній пробі, показали, що включення ³Н-тимідину в клітинах як в досвіді, так і в контролі є монотонно зростаючою функцією від часу.

Однак слід зазначити, що в заражених клітинах це включення через 24 год від початку досліду відбувалося швидше, ніж в контролі. Аналогічний характер мало зміна в часі швидкості радикальної кополімеризації 14С-акриламіду з компонентами контрольних і уражених вірусом клітин.

Представляло інтерес визначити, в якій мірі зміна рівня вільнорадикальних реакцій пов`язане з динамікою біосинтетичних процесів.

Для цього визначали в часі зміни ставлення включення ³Н-тимідину до рівня вільнорадикальних реакцій, що визначається в кожен момент часу за інтенсивністю процесу радикальної кополімеризації ¹⁴З-акриламіду з компонентами клітин.

Виявилося, що починаючи з 3 години після внесення вірусу в культуру це відношення є монотонно спадною функцією від часу.

Зміна з часом від-носіння ступеня включення ³Н-тимідину
до ступеня сополимеризации ¹⁴З-акриламіду в контрольній (1)
і зараженої (2) вірусом А12 культурі ФЕК

По осі абсцис - час після введення «міток» -
по осі ординат - відношення рівнів включення «міток».

Причому для зараженої культури ця функція згодом змінюється (зменшується) швидше, ніж в разі неінфікованих клітин.

Отримані дані підтверджують висловлене раніше одним з авторів роботи припущення про можливу функціональної залежності рівня вільнорадикальних реакцій в клітці від інтенсивності синтезу ДНК.

Ймовірно, цей зв`язок може бути опосередкована цілком певними біоенергетичними процесами, а саме синтезом і розпадом макроергічних сполук. На таку можливість побічно вказує підвищення концентрації вільних радикалів в ході анаеробного гліколізу в культурі ФЕК (А. І. Агеенко, 1974), а також утворення вільних радикалів при ферментативному гідролізі АТФ (Ю. П. Козлов, 1973).

Необхідно відзначити, що прискорення асиміляції 3Н-тимідину під впливом вірусу А12 супроводжується збільшенням ступеня сополимеризации 14С-акриламіду з компонентами клітин. Як видно з малюнках вище, зростання швидкості сополимеризации ¹⁴З-акриламіду в клітинах зараженого культури виражено більш яскраво, ніж збільшення ступеня включення ³Н-тимідину в ті ж клітини.

Ці дані добре узгоджуються з раніше отриманими фактом істотного збільшення концентрації вільних радикалів в культурі ФЕК починаючи з 24 год після зараження вірусом А12 (А. І. Агеенко, 1974).