Ізоформи і загальна активність гексокінази в цитоплазмі інтактних клітин фек при культивуванні

Встановлено, що ізоформи всіх досліджених ферментів і загальна активність гексокінази в цитоплазмі інтактних клітин ФЕК при культивуванні до 24-го дня не змінювалися. У ядерній фракції активність гексокінази 3 була збільшена протягом всіх термінів спостереження, підвищена активність ЛДГ1 на 5-й і 24-й дні, а також ЛДГЗ і МДГ1 в усі досліджені періоди.

Виявлені зміни в інтактних клітинах, ймовірно, пов`язані з їх зростанням in vitro.

Вивчення цих же ферментів в різних фазах росту нормальної культури ФЕК показало, що загальна активність гексокінази і її ізоферментів, а також ізоферментів ЛДГ в ядрі і цитоплазмі не змінювалася логарифмічною і стаціонарної фазах. Виявлено зміни активності ізоферментів тільки МДГ. Так, в ядрі була збільшена активність МДГ1, в цитоплазмі - МДГ2 в пізньої стаціонарній фазі.

Дія інфекційного вірусу А6 на культуру ФЕК не викликало змін гексокінази. Зміни ізоферментного спектра ЛДГ при впровадженні вірусу в клітину виражалися в придушенні активності ЛДГ1 в ядрі, яка в нормі була підвищена. У цитоплазмі культури зникала швидко мігруюча ЛДГ5, активність ЛДГ2 і ЛДГЗ була підвищена в 1-й і 3-й дні в порівнянні з нормою.

На 18-й день різко знизилася активність ЛДГЗ. На 24-й день інфекції зменшилася активність ЛДП і збільшилася ЛДГ2, 3 і 4.

Аденовірус 6-го типу сприяв зростанню активності МДГЗ в ядрі і в цитоплазмі на 3-й день взаємодії з вірусом і придушення МДП, яка була підвищена в нормі. Отже, при дії інфекційного вірусу на культуру ФЕК найбільші зрушення спостерігалися в ізоферментних спектрі ЛДГ (дивіться малюнки нижче).

активність ГК



Виявлено, що в ядерній фракції та в цитоплазмі культури ФЕК, зараженої онкогенним вірусом А12, відбуваються суттєві зрушення загальної активності гексокінази. Так, в ядерній фракції цей показник почав змінюватися вже на 3-й день контакту вірусу А12, з кліткою і різко підвищився на 18-й день в ядрі - в 2 рази вище норми (як і в ФЕК, інфікованих аденовирусом 6-го типу) .

На 24-й день зараження активність гексокінази в ядрі збільшилася в порівнянні з нормою в 31/2 рази (Рlt; 0,1) і в 3,3 рази (Рlt ;, 0,1), ніж в ФЕК, заражених вірусом Аб.

Дивіться малюнок - активність ГК

активність ПК

У цитоплазмі клітин культури ФЕК загальна активність гексокінази почала підвищуватися на 5-й день зараження (в 2,6 рази в порівнянні з нормою і в 2,2 рази в порівнянні з ФЕК, зараженої А6). Цей показник різко збільшився на 18-й день (в 6,6 рази в порівнянні з нормою і в 5,8 рази в порівнянні з ФЕК, інфікованої вірусом А6).

На 24-й день зараження онковірус А12 активність гексокінази в цитоплазмі була майже в 14 разів вище, ніж в нормі, і в 12 разів вище, ніж в ФЕК, зараженої А6.

Дивіться малюнок - активність ГК

Дивіться малюнок - активність ПК

Ці дані підтверджують припущення про збільшення потенційної здатності до гликолизу, пов`язаної з малигнизацией клітин (В. С. Шапот, 1975). Відзначено підвищення загальної активності ферменту в цитоплазмі в порівнянні з активністю в ядерній фракції з клітин культури, зараженої онковірус.

У ядерній фракції клітин культури ФЕК на 5-й, 8-й і 18-й дні після внесення в неї вірусу А12 зникала гексокіназа 1. На 24-й день активність цього ізоферменту була збільшена в 6 разів у порівнянні з нормою. Поступово підвищувалася активність і гексокінази 2, а активність гексокінази 3 збільшувалася на 8-й і 18-й дні і різко зростала на 24-й день інфекції.

Електрофореграми і денсітограмми изоферментов ГК (1 - 3) в глобулиновой фракції ядер клітин культури ФЕК

У ядерній фракції достовірно підвищувалася активність ЛДГ1 на 5-й і 18-й дні інфекції, а ЛДГ2 на 8-й і 18-й дні.

Електрофореграми і денсітограмми ферментів ЛДГ і МДГ в глобулиновой фракція ядер клітин культури ФЕК

Динаміка зміни активності ізоферментів ЛДГ (1 - 6) і МД1 (4 - 6) в глобулиновой ядерної фракції клітин культури ФЕК

Зміни динаміки електрорухомого ОЕП ізоферментів ЛДГ (1-3) і МДГ (4-6) в глобулиновой фракції ядер клітин культури ФЕК


Поділися в соц. мережах:

Увага, тільки СЬОГОДНІ!
По темі:
Увага, тільки СЬОГОДНІ!