Метод штучних гетерокаріонов

Відео: Разведопрос: Олексій Водовозов про лікарське шарлатанство

Метод штучних гетерокаріонов виявився вельми ефективний для багатьох тест-систем клітин, трансформованих як РНК, так і ДНК-містять онковірус.

Відео: Метод Фрейда / Freud # 39; s Method. Серіал. 11 Серія. StarMedia. детектив

У деяких випадках індикаторні культури використовували навіть для титрування звільненого вірусу по фокусів трансформації, які він індукував (Svoboda et al., 1975).

У всіх цих екс-періментах чим більше був відсоток гетерокаріонов, тим вище виявилася ефективність методу. Однак в системах, в яких використовували невірогенние пухлинні клітини, кількість гетерокаріонов, продукувати інфекційний вірус, рідко перевищувала 1%. Відносно ж вірогенних пухлин воно іноді дорівнювало 100%.

Іноді єдиним і досить ефективним шляхом «порятунку» вірусу (наприклад, RSV з клітин ссавців) було злиття цих клітин під дією инактивированного вірусу Сендай з клітинами курей, попередньо зараженими вірусами-помічниками RAVI або RAV49 (Svoboda et al., 1977).

При такому хелпер-залежному «порятунок» RSV звільнений вірус мав специфічністю не вірус-помічника, а вихідного RSV. «Врятований» вірус давав одноударний криву титрування на качиних ембріональних фібробластах, т. Е. Він не був дефектним для інфекції і трансформації цих клітин.

Відео: МАЙСТЕР-КЛАС! ШТУЧНИЙ КАМІНЬ СВОЇМИ РУКАМИ! (Частина 1)

Дані по активації ендогенних вірусів з нормальних клітин представлені у відповідній главі. Відзначимо, тільки, що ендогенні віруси, так само як і екзогенні віруси лейкозів, можуть виконувати функції вірусів-помічників при «порятунок» MSV з безвірусних гомологічних і гетерологічних клітин, трансформованих цим вірусом.

Мабуть, в клітинах, трансформованих ДНК-містять онковірус (особливо мають великий геном), в хромосомального ДНК частіше вбудовується тільки частина вірусних генів, відповідальних головним чином за трансформацію.

Тому часто індукція повного інфекційного вірусу з таких клітин, що здійснюється за допомогою різних методик, не призводить до бажаних результатів. Наприклад, підраховано, що в різних лініях клітин, трансформованих вірусом А2, міститься більше 16% фрагментів геному вірусу А2, локалізованих в лівій частині молекули, причому відзначені незначні відмінності в присутності одних і тих же рестріктазного фрагментів (від 2,9 до 6,9 копій для Е-фрагментів Hpal).

У клітинах хом`яка, трансформованих вірусом А5, як і при трансформації вірусом А2, відсутній повний вірусний геном і виявлені тільки ті фрагменти вірусного генома, які також локалізовані в лівій частині молекули. У сумі в таких клітинах виявляється від 35 до 40% генома вірусу А5 (Botchan et al., 1975).

Відео: Сергій Марков. Штучний інтелект: історія і перспективи

Аналогічні результати отримані і в відношенні аденовірусу 12-го типу.

Виявилося, що і в фібробластах ембріона хом`яка, трансформованих паповавирусов RF людини, з клітинним геномом інтегровано тільки 40% ДНК вірусу (Miao, Dougherty, 1977). Разом з тим деякі лінії клітин, трансформованих вірусом А12, і клітини пухлин, індукованих шляхом зараження новонароджених хом`яків аденовирусом людини 12-го типу, містили множинні копії від 77 до 100% вірусного генома, які були інтегровані в клітинну ДНК (Green et al.f 1977- Yano et al., 1977).