Вивчення посттранскрипційна перетворень вірусних мрнк

Вивчення посттранскрипційна перетворень вірусних мРНК в клітинах різних ліній, трансформованих SV40, показало, що в тотальному препараті РНК містяться молекули, комплементарні ранньої нитки ДНК SV40 на 22 - 69%, в той час як цитоплазматическая фракція РНК тих же клітин гібрідізіруют з Е-ниткою лише на 14 - 16% незалежно від штаму клітин (Leong et al., 1976).

У всіх досліджених системах пізня ДНК або не транскрибувати взагалі, або, якщо транскрипція мала місце, відповідні РНК в цитоплазму практично не потрапляли.

Виняток склали лише клітини мишей лінії SV - ЗТС19, в тотальній і цитоплазматичної РНК яких містилися молекули, що несуть 12 і 10% послідовностей пізньої ДНК відповідно.

Отже, для трансформації клітин досить вірусної інформації, що містяться у фрагменті ДНК, що дорівнює 14 - 16% довжини мінус-Е-нитки ДНК.

В ядрі трансформованої клітини синтезуються молекули вірусної ДНК різної довжини, проте перехід їх в цитоплазму пов`язаний з уніфікацією їх по довжині і нуклеотидних послідовностей.

Причому кількість вирусспецифических мРНК в цитоплазмі в кілька разів нижча їх змісту в тотальному препараті. У разі вірусу поліоми рання вірусспеціфіческой мРНК. в трансформованих клітинах транскрибується з Е-нитки з сегмента, локалізованого в Е-фрагменті Hpall через початкові 2/3 раннього ділянки і закінчується в районі По-фрагмента Hpall. Представлені дані, що дозволяють припускати, що і в системі in vivo відбувається, мабуть, асиметрична транскрипція інтегрованого вірусного генома.

Разом з тим експериментальне обгрунтування отримала і протилежна точка зору, згідно з якою в клітках, продуктивно заражених SV40 і вірусом поліоми, здійснюється симетрична транскрипція інтегрованої вірусної ДНК До цього висновку Aloni (1975) прийшов на підставі наступних експериментальних даних.

Асиметрична вірусна РНК, синтезована in vitro, що містить всі послідовності і еквівалентна одній з ниток ДНК, стає стійкою до дії панкреатичної РНКази після відпалу з денатурированной двунітевой РНК, очищеної з інфікованих клітин.

Величина вірусної двунітевой РНК, яка визначається електронно-мікроскопічно, відповідає розміру гігантської интактной молекули ДНК SV40.

Молекули вірусного РНК-попередника, величина яких порівнянна з величиною повного транскрипту генома SV40, мають високий рівень самоотжіга. Симетричні РНК-транскрипти потім остаточно «дозрівають» в ядрі.

Ймовірно, цей процес відбувається в інформосоми, що виходить РНК-продукт має коефіцієнт седиментації 19S. Ці 198-молекули РНК частково самокомплементарни і містять сегменти полі-А. В піку 19S знаходяться РНК, транскрібіруемих як з раннього, так і пізнього ділянки ДНК SV40.

Ядерні 19S РНК транспортуються потім в цитоплазму, де частина з них перетворюється в вірусну 16S РНК, яка є основним компонентом вірусної мРНК, що накопичується в цитоплазмі інфікованих клітин.


Поділися в соц. мережах:

Увага, тільки СЬОГОДНІ!
По темі:
Увага, тільки СЬОГОДНІ!